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Tween20在线播放_tween20是什么(2024年12月免费观看)

内容来源:方新你好影院所属栏目:导读更新日期:2024-12-04

Tween20

TWEEN-20空间:光影科技结合 𐟏⠥“牌:TWEEN-20 𐟓 地点:中国广东广州 𐟎蠨𜚓ORA⮯𘏠 𐟔 在为TWEEN-20规划空间区域的功能性时,我们意识到这个空间需要容纳产品研发、展览、直播和办公等多种业态。结合建筑本身25米宽、110米进深的原始环境,以及其独特的弧形天花结构,我们决定尽可能保留这些原始结构,并以此为基础进行设计。这样,日光可以从各个方向充分照射到这个环形空间,创造出独特的光影效果。 𐟒ᠥœ訧†觉呈现上,我们以「航空登机站」为设计概念,灵感来源于机舱窗户的方形与圆形特点,将其转化为TWEEN-20字体与辅助图形的设计语言。这不仅呼应了空间的弧形天花结构,还增强了空间、概念和视觉三者之间的关联性。 𐟔⠦�䖯𜌦ˆ‘们还在视觉设计中运用了箭头符号和数字编号,为开阔的空间标示出明确的动线引导,进一步强调了空间的秩序感和科技感。

WB实验全攻略:从准备到结果解读 𐟓š𐟔젥ꌥ‡†备 试剂清单: 分离胶、浓缩胶 SDS loading buffer(还原型,5x) 电泳缓冲液 电转缓冲液 封闭液 TBST/PBST洗膜液 抗体 预染的 Protein Marker ECL化学发光试剂 仪器设备: -20Ⰳ低温冰箱 BIO-RAD垂直板电泳转移装置或NOVEX iBlot蛋白快速电泳/干转印系统 多用脱色摇床 耗材与杂品: 各种规格的吸头、离心管和加样器 烧杯、量筒和平皿等玻璃器材 PVDF膜(0.22/0.45,根据分子量大小而定) 滤纸、手套、搪瓷盘(>20x20cm) 滚轮、计时器、吸水纸等 𐟧갟“ 试剂配制 TBST: TBS(10x) 100mL + 纯水 900mL + Tween20 5mL PBST: PBS(10x) 100mL + 纯水 900mL + Tween20 5mL 𐟖寸𐟓Š 实验步骤 样品处理:提取蛋白质,加入SDS loading buffer,进行电泳。 电泳:在BIO-RAD垂直板电泳转移装置或NOVEX iBlot蛋白快速电泳/干转印系统上进行。 转膜:将分离的蛋白质转移到PVDF膜上。 封闭:用封闭液封闭膜上的非特异性结合位点。 抗体孵育:加入一抗和二抗,进行孵育。 显色:使用ECL化学发光试剂进行显色,获取图像。 结果解读:根据显色结果,分析蛋白质的表达情况。

四种缓冲液配方,一文秒懂! 𐟔 主要用途 𐟔 相同点与不同点 𐟔 应用小技巧 𐟌Ÿ 每1000ml配方: 𐟌🠔BS (Tris-Buffered Saline) 配方:6.05克 Tris base,85.0克 氯化钠 (NaCl),用HCl调整pH值至7.4-7.6 𐟌🠔BST (Tris-Buffered Saline with Tween-20) 配方:与TBS相同,加上1ml Tween-20 𐟌🠐BS (Phosphate-Buffered Saline) 配方:1.42克 磷酸二氢钠 (NaH2PO4),8.77克 磷酸氢二钠 (Na2HPO4),90.0克 氯化钠 (NaCl),用NaOH调整pH值至7.2-7.4 𐟌🠐BST (Phosphate-Buffered Saline with Tween-20) 配方:与PBS相同,加上1ml Tween-20 (增强型TBST缓冲液增加了新型抑菌剂和防腐剂)

实验室缓冲液大揭秘! 嘿,大家好!今天咱们来聊聊那些在实验室里让人傻傻分不清的缓冲液:TBS、TBST、PBS、PBST。相信很多小伙伴都有过这样的困惑吧?别担心,看完这篇文章,你一定能搞清楚它们的区别! TBS(Tris缓冲盐水) 𐟌€ 首先,咱们来说说TBS。TBS其实就是Tris-HCl缓冲盐溶液的简称。它主要由Tris和NaCl组成。Tris提供缓冲能力,能保持溶液在弱碱性环境下稳定;而NaCl则负责调节渗透压,让它接近生理条件。TBS在免疫测定、免疫组织化学染色、原位杂交、Western blot等实验中可是个大明星,广泛用作洗涤缓冲液或抗体稀释剂。 配方也很简单:每1000ml需要6.05克Tris base和85.0克NaCl,用HCl调整pH值到7.4-7.6。 PBS(磷酸盐缓冲液) 𐟌🊦Ž夸‹来是PBS。PBS是一种以磷酸盐为主要成分的缓冲溶液,主要用于维持生物样品或实验体系中的pH稳定和渗透压平衡。它的主要成分包括KH2PO4、Na2HPO4、NaCl,有时候还会加点KCl。PBS的pH值相对稳定,常用于细胞实验、免疫染色等作为缓冲液或者洗涤液。 配方也很直观:每1000ml需要1.42克NaH2PO4、8.77克Na2HPO4和90.0克NaCl,用NaOH调整pH值到7.2-7.4。 TBST(含Tween 20的Tris缓冲盐水) 𐟧𔊧„𖥐Ž是TBST。TBST是在TBS的基础上添加了Tween 20这一成分而得到的缓冲溶液。Tween 20是一种非离子型表面活性剂,能增强洗涤效果。它在Western blot实验中特别有用,能去除非特异性结合的抗体。 配方和TBS差不多,只是多加了一毫升Tween 20。 PBST(含Tween 20的磷酸盐缓冲液) 𐟌𜊦œ€后是PBST。PBST是在PBS的基础上添加了Tween-20而得到的混合溶液。它在生物化学实验中的洗涤步骤中非常有用,能去除未结合的试剂,降低背景噪声,提高实验结果的信噪比。 配方也很简单:每1000ml PBS加上一毫升Tween-20。 总结 𐟓 总的来说,这些缓冲液在生物化学实验中都有各自的作用,但它们都含有维持溶液等渗的NaCl成分。希望这篇文章能帮你搞清楚它们的区别,下次再也不怕搞混啦! 如果你还有什么疑问,欢迎在评论区留言哦!𐟘Š

TBST和PBST的区别及配制方法 𐟧ꥮž验室小白的笔记 TBST和PBST的区别 TBST是TBS加Tween-20的缩写,而PBST则是PBS加Tween-20。两者的区别主要在于pH值和用途。 1. pH值变化:TBST的pH值随温度变化较大,而PBST容易有沉淀。如果需要反复使用抗体,建议使用TBST,因为它更稳定。 洗液效果:两种洗液在洗脱蛋白时效果相似,都能提供稳定的pH环境,并有助于蛋白的洗脱。PBST是基于磷酸盐缓冲液,而TBST是基于Tris缓冲液。 TBS缓冲液 TBS缓冲液是生物学中常用的等渗缓冲盐溶液,主要用于免疫组化、原位杂交和酶联免疫等实验中,清洗免疫印迹实验中非特异性结合的抗体等。它的配方(1X浓度)包括:1L的10X PBS缓冲液(1.37 M NaCl, 27 mM KCl, 100 mM Tris, pH 7.4),加入0.1%的Tween-20(1 mL/L PBS),再补足至1L以获得最终浓度。配置步骤如下:首先,用蒸馏水稀释10X PBS至1X,再加入Tween-20,混合均匀后过滤或离心去杂质。最后,分装到无菌瓶中,存放在4℃的阴凉处,避免反复冻融。 PBS缓冲液 PBS缓冲液是指磷酸缓冲液(Phosphate Buffer Solution),渗透压近似于生理条件又有很强的pH缓冲能力,常用来洗细胞(不易涨裂)和作为细胞培养的基础液(pH缓冲)。它的配方为10X PBS(1.37 M NaCl, 27 mM KCl, 100 mM Na2HPO4, 18 mM KH2PO4, pH 7.4),稀释至1X后加入0.1% Tween-20。与TBST相似,配制后过滤,分装并保存在适宜条件下。 总结 TBST和PBST在实验室中都有广泛的应用,但它们在pH值和用途上有所不同。选择哪种洗液取决于你的具体实验需求。希望这些信息对你有所帮助!

BST不宜高压灭菌:防止吐温20起昙现象的有效方法 TBST(Tris-Buffered Saline with Tween 20)是一种常用的生物化学缓冲液,在Western blot等实验中用于洗涤膜上的非特异性结合物质。 TBST中含有Tween 20,这是一种非离子型表面活性剂,具有增溶和乳化的作用。 然而,Tween 20在高压灭菌过程中可能会出现起昙现象,这是由于Tween 20中的疏水基团与水分子之间的氢键缔合在高温下被破坏,导致相分离。 这种现象可能会影响TBST的性能和使用效果。 为了防止Tween 20在TBST中起昙,可以采取以下有效方法: 1.过滤除菌: 使用0.22微米的微孔滤膜对TBST进行过滤除菌。这种方法可以避免高温对Tween 20的影响,同时保证TBST的无菌状态。 需要注意的是,Tween 20本身比较粘稠,高浓度时可能不好过滤。因此,在过滤前可以将TBST适当稀释,以降低Tween 20的浓度,提高过滤效率。 2.无菌操作: 在配制和使用TBST时,严格遵守无菌操作规程,避免污染。 使用无菌的容器和器具,确保整个操作过程的无菌性。 3.避免高温处理: 尽可能避免对TBST进行高温处理,如高压灭菌等。 如果确实需要对TBST进行灭菌处理,可以考虑使用其他非高温的灭菌方法,如紫外线灭菌或化学灭菌(但需注意化学灭菌剂对TBST成分的影响)。 4.质量控制: 在配制TBST时,严格控制各成分的比例和浓度,确保TBST的质量和稳定性。 定期对TBST进行质量检测,包括无菌检测、pH值检测等,以确保其符合使用要求。 综上所述,为了防止Tween 20在TBST中起昙,建议采用过滤除菌的方法对TBST进行灭菌处理。同时,在配制和使用过程中严格遵守无菌操作规程,避免高温处理,并进行质量控制以确保TBST的质量和稳定性。这些方法可以有效防止Tween 20的起昙现象,保证TBST在生物化学实验中的正常使用效果。 #广州华韵生物科技有限公司#

实验盲盒坑,小白必看! 最近两个月的实验经历简直像是在开盲盒,每次都有新的bug等着我。以下是我总结的一些实验bug,希望能和大家分享一下,希望大家能从我的经历中吸取教训。 制冰机门忘记关 ❄️ 原因:打冰的时候,盆子太重,打完冰就想赶紧扛走,结果忘了关制冰机门。 改进:每次打冰都要记得关门。 后续:虽然记得关门了,但挖冰勺却落在制冰机里了。 忘记设timer ⏰ western blot的bug 𐟐› 每次做western blot都像是在开盲盒,修复了这个bug,又有新的bug出现,完全不知道会有什么新问题。 显影的条带出现白色反光 𐟌ˆ 原因:配制TBST时忘记加tween 20,导致洗掉特异性条带。 改进:配置新的TBST,bug消失。 条带呈一条直线 𐟓 原因:未知,无法修复。 膜上有一块块黑斑 𐟖䊥ŽŸ因:封闭液(脱脂牛奶+TBST)没有摇均匀,导致未溶解的颗粒还在膜上。 改进:在拍电泳的时候就配好封闭液,至少摇了两个小时,bug消失。 非特性条带很多 𐟌Ÿ 原因:未知,无法修复。 显不出条带 𐟘𕊥ŽŸ因:一张膜剪开两半,上下各孵育一张,加反了抗体。 改进:用一抗二抗去除液。 本应一抗收集,二抗丢弃;我:一抗丢弃,二抗收集 𐟧ꊥŽŸ因:一抗贵,二抗便宜。 琼脂糖凝胶电泳的bug 𐟧슭arker忘记加loading 𐟚능ꌦ„外 𐟒劥𜀤𘙩†‡的盖子,“啵”的一声,盖子上的余液溅到手臂上。 改进:开的时候用手捂着瓶口,就不会溅出来,bug消失。 制胶的时候插梳子,溅到脸上。 改进:离远一点插;插慢一点,让它沿壁流下来,bug消失。 希望这些小故事能给大家带来一些笑料,也希望大家能从我的经历中吸取教训,避免踩同样的坑。实验室的小白们,加油!𐟒ꀀ

Western Blot技巧:转膜封闭 𐟔 蛋白转膜:选择合适的膜材料 在Western Blot实验中,选择合适的膜材料至关重要。聚偏二氟乙烯膜(PVDF)相较于硝酸纤维素膜,在蛋白质截留能力、机械强度和化学相容性上都有显著优势。PVDF膜的蛋白质结合量是硝酸纤维素膜的两倍,且结合强度更强,使其在各种染色应用和多重免疫检测中成为理想选择。特别是对于需要进行N端蛋白测序的实验,PVDF膜在严苛的清洗条件下仍能保持完好,是测序实验的首选膜材料。 𐟔젨𝬨†œ后蛋白的检测 为了验证转膜是否成功,可以使用丽春红染色。丽春红染色剂带负电荷,能够与带正电荷的氨基酸残基结合,形成红色条带,从而检测转膜效果。这种染色方法是可逆的,染色后可以用蒸馏水、PBS或其他适当溶液洗去。 𐟛᯸ 膜的封闭 杂交膜上存在许多非特异性蛋白质结合位点,这些位点可能与抗体结合,导致非特异性染色和背景。为了降低这种非特异性结合,通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂封闭膜上的未结合位点。常见的封闭剂包括BSA、脱脂奶粉、酪蛋白、明胶和Tween-20(0.05-0.1%)等。 𐟧ꠔween-20:非离子型去污剂 Tween-20是一种非离子型去污剂,具有复性抗原的作用,可提高特异性的识别能力。它不破坏蛋白结构,能减少对蛋白质之间相互作用的破坏,从而提高实验的特异性。 𐟥› 脱脂奶粉或BSA:封闭剂的选择 使用脱脂奶粉或BSA作为封闭剂时,需注意以下几点: 脱脂奶粉不能与生物素化或伴刀豆蛋白标记的抗体一起使用,因为脱脂奶粉含有糖蛋白和生物素。 如果封闭剂中含有磷酸酶,用磷酸化特异性抗体分析磷酸化蛋白时可能会受到影响,因为磷酸酶与印记膜上的磷酸化蛋白接触可使之去磷酸化。 某些抗体用BSA封闭时可能会产生比脱脂奶粉更强的信号,请仔细阅读说明书注明的注意事项和膜的特殊封闭方法。 通过这些技巧,可以有效提高Western Blot实验的准确性和可靠性,为蛋白质研究提供有力支持。

免疫荧光与免疫细胞化学实验全流程详解 免疫荧光(IF)和免疫细胞化学(ICC)是免疫学研究中常用的技术,通过抗原-抗体反应,结合荧光或酶标记,来检测细胞或组织中特定蛋白质的定位和表达。以下是这两种实验的详细流程: 一、玻片制备 细胞培养:将细胞培养在盖玻片或孔板中,直到达到实验所需的状态。 组织切片:将组织固定后,切成薄片,并固定在载玻片上。 二、固定 方法一:在100%冰甲醇中孵育细胞5分钟。固定完成后,用PBS洗涤细胞3次,每次5分钟。 方法二:在4%多聚甲醛中孵育细胞10分钟。固定完成后,用冰PBS洗涤细胞3次,每次5分钟。 三、抗原修复(可选) 对于某些抗体,抗原修复后可以获得更好的效果。具体修复方式请参考抗体使用说明书。 四、通透 用含0.3%Triton X-100的PBS孵育样品10分钟。注意,Triton X-100会破坏细胞膜,因此不适用细胞膜抗原。通透完后,用PBS洗涤细胞3次,每次5分钟。 五、染色(以双重染色为例) 封闭:用封闭液(1%BSA、22.52mg/ml甘氨酸、0.1%Tween-20的PBS)孵育细胞30分钟。 一抗孵育/洗涤:用两种一抗(溶于1%BSA的PBST中)在湿盒中孵育1小时,或4℃过夜孵育。然后倒出溶液,用PBS洗涤3次,每次5分钟。 二抗孵育/洗涤:室温下,用两种二抗(溶于1%BSA的BSA中)避光孵育细胞1小时。 六、复染 孵育:用0.1-1/ml Hoechst或DAPI孵育细胞1分钟。 洗涤:用PBS洗涤细胞。 七、封片 用一滴封片介质封闭盖玻片,并用指甲油密封盖玻片,避免样品变干和在显微镜下移动。样品可以保存在-20℃或4℃避光条件下。 八、数据收集与成像 使用显微镜收集数据,并进行适当的成像处理。 通过以上步骤,你可以轻松完成IF/ICC实验,并获得准确的实验结果。

实验结果图缺失条带?可能原因及解决方法 亲爱的实验小伙伴们,最近有不少小伙伴在问实验结果图中没有条带的问题,别担心,这里有一些可能的原因和解决方法供大家参考: 𐟔 可能原因及建议: 1️⃣ 一抗和二抗加错了,或者不匹配 请仔细检查一抗和二抗是否加对,确保选择的是针对一抗来源种属的二抗。 2️⃣ 一抗浓度过低或蛋白浓度不足 尝试使用新鲜的抗体;调整抗体浓度,避免重复使用。 3️⃣ 发光液失效或不灵敏 使用新鲜的灵敏型发光液。 4️⃣ 转膜不充分或时间过长 用丽春红染膜确认条带是否转至膜上,适当调整转膜时间和电流。 5️⃣ 封闭过度或洗脱过度 减少封闭时间;减少洗膜时间,降低去垢剂浓度,建议使用不高于0.1%的温和去垢剂Tween-20。 6️⃣ 蛋白降解 提取蛋白样本时加入蛋白酶抑制剂;处理样本时在冰上操作。 𐟤” 如果有更多问题,欢迎大家一起探讨!

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