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abcam前沿信息_abcam抗体官网中国(2024年12月实时热点)

内容来源：方新你好影院所属栏目：教程更新日期：2024-12-03

abcam

科研日记：小鼠皮肤蛋白提取失败原因大揭秘快三个月没跑WB了，结果一出来就给我这么大的“惊喜”，各种问题层出不穷，真是笑死我了𐟘‚。样本来源：C57小鼠皮肤（1%SDS裂解，默克蛋白酶抑制剂，磷酸化酶抑制剂）电泳参数：金斯瑞的预制胶，电泳80v 10min，120v 60min，转膜湿转250mA 60min 抗体比例：5%BSA封闭2小时，一抗GAPDH过夜（abcam 1:10000），二抗羊抗兔1小时（三鹰 1:10000），洗膜10分钟X3 样本是昨天提取的，除了转膜液，其他都是新配的。所有问题都集中在一张膜上，真是“教科书”级别的失败案例啊𐟙‹。朋友们，快来讨论下可能的原因吧！

Western Blot测p38秘籍最近做了一次Western Blot，检测到了p38，分享一下经验供大家参考。 𐟌🠦Š—体选择：使用的是Abcam的抗体，具体货号在图3和图4中。 𐟌🠧𛆨ƒž蛋白提取：用RIPA裂解液（200ul/孔，6孔板）提取细胞蛋白。 𐟌🠧”𕦳𓦝᤻𖯼š转膜前，加入预染蛋白煮15分钟。上样量40ug，使用雅酶预制胶10%（PAGE）进行电泳，先以80V跑30分钟，再以100V跑40分钟。Marker使用的是雅酶的。 𐟌🠨𝬨†œ操作：在冰浴中，以230mA电流转膜90分钟，确保电压保持在130V以下。 𐟌🠥𐁩—�‡程：使用碧云天QuickBlock™ Western封闭液（货号P0252），封闭30分钟。 𐟌🠤𘀦Š—孵育：一抗pp38和p38均按1:1000的比例用雅酶的一抗稀释液稀释，放在4度冰箱摇床上过夜。蛋白显影在41kDa左右。希望这些信息对大家有所帮助！

想买abcam的抗体，因为太贵退而求其次选了个Thermo的抗体，抗体还没到手里abcam打折了…… 叹气……

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